C18固相萃取小柱是一種常用的樣品處理技術,主要用于分離和凈化生物樣品中的有機化合物。以下是C18固相萃取小柱的使用方法:
1. 準備工作:
a. 確保實驗室環(huán)境干凈整潔,通風良好。
b. 準備好所需的實驗器材和試劑,如C18固相萃取小柱、離心機、渦旋振蕩器、天平、移液器等。
c. 根據待測樣品的量選擇合適的C18固相萃取小柱規(guī)格。
2. 樣品處理:
a. 首先將待測樣品溶于適當的溶劑中,通常使用甲醇或乙腈作為溶劑。
b. 在渦旋振蕩器上充分混勻樣品溶液,然后通過離心機去除殘留的氣泡。
c. 用移液器將適量的樣品溶液轉移到C18固相萃取小柱上,注意不要超過小柱的容量。
d. 將C18固相萃取小柱放入離心機中,以適當的速度離心,使樣品溶液充分滲透到小柱中。
3. 洗滌步驟:
a. 用適量的新鮮溶劑(如水或甲醇)沖洗C18固相萃取小柱,以去除多余的樣品溶液。
b. 重復上述洗滌步驟,直到流出的溶劑無色清澈。
c. 將洗滌后的C18固相萃取小柱放在離心機中離心,以去除殘留的溶劑。
4. 收集目標物質:
a. 從C18固相萃取小柱上切下一段合適長度的部分,將其插入濾紙或濾膜上。
b. 將濾紙或濾膜放入離心機中,加入適量的洗脫劑(如甲醇或乙腈),離心后收集濾紙上的洗脫液。
c. 重復上述操作,直到濾紙上的洗脫液顏色變淺或不再有明顯的變化。
5. 分析目標物質:
a. 對收集到的洗脫液進行光譜分析,如紫外-可見光譜、紅外光譜或質譜分析等。
b. 根據分析結果,確定待測樣品中的有機化合物的種類和含量。
6. 廢棄物處理:
a. 對于一次性使用的C18固相萃取小柱,在實驗結束后應按照當地環(huán)保法規(guī)妥善處理。
b. 對于可重復使用的C18固相萃取小柱,在清洗并晾干后可以再次使用。
7. 注意事項:
a. 在整個實驗過程中要保持良好的實驗室習慣,避免交叉污染。
b. 不同類型的C18固相萃取小柱可能需要不同的洗脫條件,因此在實際操作時需根據具體情況調整實驗步驟。
發(fā)布于: 2023-09-12