??????? 雖然質譜聯用液相色譜已被證明是發現組學（蛋白質組學、脂質組學、代謝組學、食物組學和糖組學）領域的強大工具。組學研究經常受到樣本復雜性的挑戰。在處理少量樣品、小體積和復雜的樣品基質（生物流體和單細胞分析）時，對感興趣的分子進行識別和量化可能特別困難。液相色譜柱小型化可以克服這些挑戰。減小色譜柱內徑 (ID) 會降低色譜稀釋度并提高靈敏度，從而實現更高效的 MS/MS 采樣，從而實現更多的分子鑒定。
??????? 當樣品量被注入色譜柱并被周圍的溶劑稀釋時，就會發生這種稀釋。在這種情況下，更少的溶劑意味著更少的色譜稀釋，這是使用更小的內柱直徑的結果。色譜稀釋度的降低會導致離子靈敏度的提高，從而實現更有效的 MS/MS 采樣，從而實現更多的分子鑒定。恒譜生新推出10#x20空柱管總成，具有較小內徑的小型化液相色譜柱可提高靈敏度。
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??????? 從理論上講，將色譜柱內徑從 2.1 mm 縮小到 0.300 mm 會導致樣品濃度增加 49 倍，這將轉化為靈敏度提高 49 倍。實際上，情況并非總是如此，靈敏度是通過離子強度測量的，離子強度取決于樣品濃度以外的其他因素，例如分析物的電離性質，以及 LC-MS 設備（發射器類型）和源參數。
?????? 一、 根據色譜柱類型 (ID)，液相色譜中使用的典型流速和樣品裝載量。
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??????? 二、小型化優勢
???????? 色譜柱小型化減少了色譜稀釋并大大提高了電離效率，這種組合使納流成為 Omics 領域非常理想的技術，當只有少量樣品可用和/或由于添加非揮發性溶劑或需要更好的電離時鹽。除了提高靈敏度、更高的 S/N（信噪比）和更低的 LLOQ（定量下限）之外，它還減少了溶劑消耗，從而降低了成本并有益于環境。同時，隨著流速的降低，有時需要增加梯度長度。梯度長度的增加會降低樣品通量。盡管如此，當需要樣品通量、靈敏度和穩定性時，微流是一個很好的中間選擇。
??????? 此外，色譜柱堵塞和過載也需要被視為微觀固體，在蛋白質組學的情況下，未消化的蛋白質會堵塞小 ID 色譜柱，使其無法使用。因此，用戶必須小心在進樣前正確清潔樣品和/或使用捕集（柱前）柱以消除不希望的污染物到達小型柱。當使用捕集柱時，捕集器與柱對齊，樣品被裝入其中，而不需要的顆粒被浪費。一旦樣品被濃縮到捕集阱中并且沒有污染物，它就會被導向色譜柱進行分析。使用恒譜生鬼峰捕集柱有助于避免納米/微米級色譜柱污染并延長色譜柱的使用壽命。鬼峰小柱能夠將有機相中污染物，水相中污染物，緩沖鹽，流動相瓶和混合過程產生的污染物過濾。
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??????? 色譜分析柱小型化會帶來許多挑戰，但不可否認的是，好處大于這些挑戰。5微流和納流分離帶來全新的生物醫學進步和基礎科學知識的收獲使其成為一種強大的分析技術。
發布于: 2022-05-20