? ? ? ? 液相色譜柱是實驗室中用于分離和純化化合物的重要工具。然而,使用液相色譜柱時需要注意一些關鍵事項,以確保其性能和壽命。此外,保持良好的色譜柱性能可以提高分析結果的準確性和可靠性,這一點對于科研工作者來說,也是至關重要的。
? ? ? ??1、流動相和樣品的過濾
? ? ? ??在注入液相色譜系統之前,所有流動相都應經過過濾,以避免流動相中的雜質對色譜柱造成污染。特別是當流動相中含有緩沖鹽時,過濾更加重要。另外,所配制的樣品試液在注入流路系統前也要過濾,以防止濾膜溶解而造成污染。要使用與流動相互溶的溶劑進行過濾。
? ? ? ??2、樣品的凈化
? ? ? ??如果樣品中含有對色譜柱有損害的化學成分,如產生永久性吸附的蛋白質、糖等有機分子和強吸附性物質,進樣前應盡可能對樣品進行分離提純以除去多余雜質組分。這有助于保護色譜柱,延長其使用壽命。
? ? ? ??3、柱壓的控制
? ? ? ??在液相色譜分析過程中,要避免突然打開或關閉閥門導致壓力的快速變化,因為這可能會對色譜柱造成損害。當柱壓過高時,應盡可能采用較小的流速。這樣可以保護色譜柱,并確保分析結果的準確性。
? ? ? ??4、溫度和酸堿度的調節
? ? ? ??溫度和酸堿度是影響色譜柱性能和壽命的重要因素。溫度過高會加速硅膠的溶解和填料的性質改變,從而降低柱效,改變峰形。因此,在使用過程中要注意控制溫度,特別是在使用以硅膠為基質的色譜柱時。此外,還要注意流動相的酸堿度,確保其與色譜柱的pH適用范圍相匹配。避免極端的pH條件可以保護色譜柱并延長其使用壽命。
? ? ? ??5、及時的沖洗
? ? ? ??每次使用完畢后,應立即用適當的溶劑清洗色譜柱,以避免殘留物對柱子造成損害。開始試驗前,也要了解柱中當前是何種溶劑,以避免溶劑不兼容的情況。通過正確的沖洗步驟可以確保色譜柱的性能穩定和延長其使用壽命。
? ? ? ??6、保護柱的使用
? ? ? ??為保護分析柱免受污染和損害,可以加裝保護柱。保護柱的作用是過濾掉來自流動相和樣品的化學“垃圾”,同時除去流動相和樣品中的不溶物。因此,在分析中藥、中成藥等復雜混合物和生物樣品時,加裝保護柱是必不可少的措施。建議根據具體實驗條件和樣品性質選擇合適的保護柱,并定期更換。
發布于: 2023-12-11